題目：

Priming effect of autochthonous organic matter on enhanced degradation of 17α-ethynylestradiol in water-sediment system of one eutrophic lake

期刊：Water Research

影響因子：9.13

PMID：32726734  

一作者：白雷雷

通訊作者：江和龍研究員

作者單位：中國科學院南京地理與湖泊研究所

索萊寶合作產品：

2.細菌活性對OM輸入的反應

2.1胞外聚合物（EPS）產量

為了研究細菌代謝活性變化，作者對胞外聚合物產量進行研究。研究結果發(fā)現(xiàn)較高濃度的COM和MOM主要促進膠體EPS（C-EPS）的產生，而三種OM對結合EPS（B-EPS）分泌的影響更為相似（圖2）。此外，雖然在一個月時，內源性OM對EPS產生的促進作用強于HA，但在孵育結束時，HA對胞外蛋白和多糖的分泌有顯著的促進作用。有效碳源也可以增加細菌數(shù)量，促進沉積物中EPS的分泌，導致總EPS濃度與OM中可生物降解濃度之間正相關。色氨酸和酪氨酸樣組分與第30天EPS中的蛋白質濃度顯著正相關，多糖濃度與酪氨酸樣組分正相關。HA具有大的表面積和與EPS中的脂肪族、芳香族和羧基的強結合位點，因此它也可能通過結合增加EPS濃度。此外，HA的沉積物中胞外酶活性較低也有助于在培養(yǎng)過程中EPS的逐漸積累。

2.2胞外酶活性

接著為了比較水-沉積物系統(tǒng)中細菌群落的代謝活性，作者研究了5種胞外酶的活性。孵育30天后，1mg C g^-1的OM使UA活性從227.64增加到255.92-327.65U/g，顯著低于3mg C g^-1OM沉積物中的UA活性。第30天脲酶UA的活性依次為3C-G（COM at 3mg C g^-1）>3M-G（MOM at 3mg C g^-1）>3H-G（HA at 3mg C g^-1），但在孵育結束時，它們的活性接近。此外，盡管在第30天，3mg C g^-1的COM和MOM的促進作用明顯強于HA，但OM沉積物中終中性蛋白酶NPA活性之間未觀察到顯著差異（圖3b）。3mg C g^-1的原生有機物OM顯著增加二乙酸熒光素FDA活性（P<0.05），但終FDA活性在C-G（COM at 1mg C g^-1）、M-G（MOM at 1mg C g^-1）和H-G（HA at 1mg C g^-1）中相似（圖3c）。對于脫氫酶DHA，1mg C g^-1的COM比MOM更能增強DHA活性，而3M-G的DHA在孵化結束時活躍（圖3d）。此外，3mg C g^-1的HA對DHA活性沒有顯著影響。相關性表明，UA、FDA和DHA活性與第30天OM中的蛋白酪氨酸樣物質顯著正相關。因此，內源性有機質的輸入對胞外酶活性的影響主要是暫時的，且與有機質的數(shù)量和質量有關。

COM和MOM改善的沉積物中UA活性較高，說明OM等原生沉積物中豐富的含氮化合物（如蛋白質、多肽和氨基酸）是細菌的有效氮源，促進了沉積物中氮的循環(huán)。由于大多數(shù)沉積微生物可以產生蛋白酶來水解肽鍵，從而將多肽鏈中的氨基酸連接在一起，COM和MOM中類似蛋白質的成分的存在也增加了NPA活性。但隨著有機質的降解，添加的養(yǎng)分逐漸礦化，NPA活性降低。FDA的高活性也表明OM沉積物中有較強的微生物代謝活性。UA、NPA、FDA和DHA活性的增強表明，原生有機質的存在創(chuàng)造了一個活躍的微生物群落，其中可能包括增強的EE2代謝。

3.細菌群落結構對OM輸入的反應

3.1細菌群落組成

后作者為了研究細菌群落的演化，利用高通量基因測序技術，從種群組成、結構和代謝基因等方面進行分析。高通量結果共產生307680個序列，并以97%的同一性分配給1588個OTU。根據(jù)qPCR分析，COM和MOM的存在更有利于細菌在第30天的生長，而長期暴露于HA也增加了生物量的生長。在2個月的培養(yǎng)期間，細菌群落組成的演變存在時間變異性。第30天，3C-G和3M-G的細菌群落與其它細菌群落有明顯區(qū)別，而3C-G和3M-G的細菌群落相互接近，終與C-G和M-G的細菌群落有所不同。這一結果突出了細菌群落組成對有機質濃度的敏感性。

為了闡明特定菌群對OM數(shù)量和質量的反應，確定了每個熒光OM組分的強度與細菌在類別和種屬水平上的相對豐度之間的Spearman相關性（圖4a和b）。

基于Spearman的OTU和熒光OM組分之間的相關性，進一步構建了共現(xiàn)網(wǎng)絡（圖4c和d）。正相關性占兩個網(wǎng)絡總相關性的一半以上。OTU之間的緊密相關性表明微生物在降解可生物降解有機質組分時具有很強的種間相互作用。

蛋白質類物質與群落成員之間的關聯(lián)性更強，說明微生物在利用有機質等原生物質時比在腐殖酸降解過程中更傾向于共生和聚集。微生物之間的促進性相互作用可以協(xié)調微生物群落，以發(fā)展污染物降解的自發(fā)適應和代謝可塑性。因此，EE2降解的增強不僅與群落豐富度或物種豐富度的變化有關，而且與AOM沉積物中參與種間共營養(yǎng)合作的代謝途徑有關。

3.2細菌群落功能

由于代謝功能基因在OM 3mg C g^-1微環(huán)境中所占比例大，因此對其變化進行了進一步的研究（圖5）。其中碳水化合物代謝豐富，其次是氨基酸代謝、脂類代謝和外源生物降解代謝。輸入內源性OM后，各組間差異有顯著性。

碳水化合物和氨基酸代謝途徑的增加表明，COM組和MOM組的碳周轉率和碳源利用率較高。此外，COM和MOM中的高分子量物質也可能誘導參與脂質代謝的功能基因顯著上調。因此，代謝的上調很大程度上依賴于不穩(wěn)定有機物成分的刺激。

與外源降解EE2相關的微生物個體的增加解釋了EE2降解速度加快。氨基酸、碳水化合物和外源代謝基因的同時增加也證實了EE2降解中出現(xiàn)的共代謝現(xiàn)象。

外源生物降解能力的顯著增加表明，類似OM的輸入在沉積物中不僅通過增加細菌群落的活性增加了EE2的降解，而且通過重塑細菌的功能基因增加了EE2的降解。

氣候變化和日益嚴重的富營養(yǎng)化預計將增加淡水湖泊原生有機物的生物產量。本文研究了某富營養(yǎng)化湖泊底泥系統(tǒng)原生有機物輸入對細菌群落及后續(xù)EE2降解能力的啟動效應。有機質中可生物降解的組分也是細菌群落向富營養(yǎng)化狀態(tài)轉化的關鍵因素，促進了微生物間的相互作用，并導致有機碳和外源化合物代謝功能基因的上調。細菌群落活性、組成和功能的變化顯著促進了EE2的降解，藍藻為主的區(qū)域可能是富營養(yǎng)化淡水湖泊雌激素衰減的潛在熱點區(qū)域。

備注